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    總抗氧化能力(T-AOC)檢測試劑盒

    簡要描述:總抗氧化能力(T-AOC)檢測試劑盒,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

    • 產品型號:TO1001
    • 廠商性質:生產廠家
    • 更新時間:2024-11-01
    • 訪  問  量:296

    詳細介紹

    活性氧(Reactive oxygen species, ROS)主要包括羥基自由基、超氧自由基和過氧化氫。在細胞或組織的正常生理代謝過程中會

    產生活性氧,同時一些環(huán)境因子例如紫外照射、環(huán)境污染等也可以誘導活性氧的產生,活性氧產生后可以導致細胞內脂、

    蛋白和DNA等的氧化損傷,誘發(fā)氧化應激(Oxidative stress),繼而導致各種腫瘤、動脈粥樣硬化、風濕性關節(jié)炎、糖尿病、

    肝損傷、以及中樞神經系統(tǒng)疾病等。機體中存在多種抗氧化物,包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等,可以清除體內產生的

    各種活性氧,以阻止活性氧誘導的氧化應激(oxidative stress)的產生;一個體系內的各種抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的總

    的水平即體現(xiàn)了該體系內的總抗氧化能力,因此測定血漿、血清、尿液、唾液等各種體液,細胞或組織等裂解液中的總抗氧化

    能力具有非常重要的生物學意義。


    總抗氧化能力(T-AOC)檢測試劑盒即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTS method,

    簡稱T-AOC Assay Kit,是一種采用ABTS作為顯色劑,可以對血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細胞或組織等裂解液、

    植物或中草藥抽提液、或各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力進行檢測的試劑盒;ABTS法測定T-AOC的檢測原理是

    在氧化劑作用下ABTS被氧化成綠色的ABTS?+,在抗氧化物存在時ABTS?+的產生被抑制,可在734nm或405nm測定ABTS?+的

    吸光度即可測定并計算出樣品的總抗氧化能力。Trolox是一種維生素E的類似物,具有和維生素E相似的抗氧化能力,

    可作為其它抗氧化物總抗氧化能力的參考,例如Trolox的總抗氧化能力為1,相同濃度情況下,其它物質的抗氧化能力可用其抗氧

    化能力和Trolox相比的倍數來表示,該試劑盒快捷方便,加入待測樣品3~6分鐘即可進行吸光度測定,

    通常10~20個樣品可以在20分鐘內檢測完畢。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。


    操作步驟(僅供參考)

    自備材料:

    1、蒸餾水

    2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管

    3、低溫離心機、恒溫箱或水浴鍋、酶標儀、酶標板


    操作步驟(僅供參考):

    1、準備樣品∶

    ①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉,加入2.5ml PAL Lysis Buffer,冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿,4℃ 10000r/min

    離心15~20min,留取上清液,-20℃凍存,用于苯丙氨解氨酶的檢測。

    ②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于苯丙解氨的檢測。

    ③細胞或組織樣品∶取恰當細胞或組織裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液,

    -20℃凍存,用于苯丙酸解氨酶的檢測。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶,可以使用蒸餾水或PAL

    Lysis Buffer稀釋進行恰當的稀釋。

    2、PAL加樣∶

    取96孔板,按照下表設置對照孔、測定孔,溶液應按照順序依次加入,并

    注意避免產生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置2平行孔,

    求平均值。

    加入物(μl)對照孔測定孔

    蒸餾水150100

    待測樣本5050

    PAL Assay Buffer-50

    3、PAL檢測︰

    以對照孔為對照(調零),酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為   A測定0);40℃準確孵育1h,立即加入10μl PAL終止

    液終止反應(備選方案),以對照孔為對照調零,酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1)。

    注意︰加入PAL終止液終止反應為非必須步驟,可37℃準確孵育1h后直接以對照孔為對照調零,酶標儀立即測定290nm處測定

    孔的吸光度。

    注意事項∶

    1、待測樣品中不能含有酶抑制劑,同時需避免反復凍融。

    2、獲得上清液為PAL酶液,應盡快檢測,亦可-20°℃保存。

    3、如果沒有可測定紫外區(qū)的酶標儀和酶標板,也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿,但應注意比色杯的最小檢測體積。

    4、每次檢測指標不宜過多,否則操作時間不一,有可能導致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。




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